ГОСТ 17405-81 Антиген сапной для реакции связывания комплемента. Технические условия
Срок введения установлен с 01.01.1983 г. до 01.01.1988 г.* ________________* Ограничение срока действия снято постановлением Госстандарта России от 30.06.92 N 620 (ИУС N 9-92). - Примечание изготовителя базы данных.
ВЗАМЕН ГОСТ 17405-72
ВНЕСЕНО Изменение N 1, утвержденное и введенное в действие Постановлением Госстандарта СССР от 27.05.1987 N 1711 c 01.10.1987
Изменение N 1 внесено изготовителем базы данных по тексту ИУС N 8, 1987 год
Настоящий стандарт распространяется на сапной антиген, представляющий собой экстракт убитых сапных бактерий, предназначенный для реакции связывания комплемента (РСК) при диагностике сапа.
1. ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ
1. ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ
1.1. Сапной антиген должен изготовляться в соответствии с требованиями настоящего стандарта по технологическим правилам, утвержденным в установленном порядке.
1.2. По физическим и биологическим свойствам сапной антиген должен соответствовать требованиям и нормам, указанным в табл.1.
Характеристика и норма
Прозрачная, слегка опалесцирующая жидкость светло-желтого цвета без осадка и механических примесей
Посевы на питательные среды должны быть стерильными
Разрешающая способность единицы активности референс-препарата (ЕАрп)
В смеси с сапной сывороткой должен вызывать задержку гемолиза эритроцитов в РСК и не вызывать ее в смеси с негативной сывороткой
Отсутствие антикомплементарных свойств
Без сапной сыворотки не должен вызывать задержки гемолиза эритроцитов
Отсутствие гемолитических свойств
Без сапной сыворотки и комплемента не должен вызывать гемолиза эритроцитов
2. ПРАВИЛА ПРИЕМКИ
2.1. Сапной антиген принимают сериями.
Под серией следует понимать любое количество сапного антигена, полученное за один технологический цикл, в одной емкости. Серия должна иметь свой номер, номер государственного контроля и оформлена одним документом о качестве.
2.2. Каждая серия сапного антигена должна быть принята на предприятии-изготовителе государственным контролем Всесоюзного государственного научно-контрольного института ветеринарных препаратов Госагропрома СССР.
2.3. Внешний вид сапного антигена определяют по каждой ампуле всей серии препарата.
2.4. Для контроля качества сапного антигена от каждой серии отбирают 40 ампул препарата.
2.5. При получении неудовлетворительных результатов испытаний хотя бы по одному из показателей по нему проводят повторные испытания удвоенного количества ампул с препаратом.
Результаты повторных испытаний распространяются на всю серию.
2.6. Контроль качества препарата по требованию потребителя проводит государственный контролер или Всесоюзный государственный научно-контрольный институт ветеринарных препаратов Госагропрома СССР.
3. МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ
3.1. Метод отбора проб
3.1.1. Ампулы отбирают из разных мест нескольких упаковочных единиц. 20 ампул используют для испытаний, а 20 оставляют в архиве государственного контролера на 3 года.
3.2. Для определения внешнего вида, отсутствия осадка и примесей ампулы с сапным антигеном встряхивают и просматривают в проходящем свете.
3.3. Определение стерильности
3.3.1. Аппаратура, материалы и реактивы
Термостат с температурой нагрева 37-38°С.
3.3.2. Подготовка к испытанию
В соответствии с действующей рецептурой готовят мясопептонный агар (МПА), МПА с 2-4% глицерина, мясопептонный бульон (МПБ) по ГОСТ 20730-75, мясопептонный печеночный бульон (МППБ) под вазелиновым маслом (среда Китт-Тароцци) и среду Сабуро. Среды разливают по 8-10 см 3.3.3. Проведение испытания
Проводят высев по 0,2-0,3 см 3.3.4. Обработка результатов
Посевы должны оставаться стерильными при выдерживании их в термостате в течение 10 сут при температуре 37-38°С, а на среде Сабуро - при 20-22°С.
3.4. Определение активности (титра), специфичности, разрешающей способности, отсутствия антикомплементарных и гемолитических свойств антигена
3.4.1. Аппаратура и реактивы
Баня водяная с терморегулятором.
Центрифуга на 3 тыс. об/мин.
Пипетки мерные по ГОСТ 20292-74, вместимостью 1, 2, 5, 10 см 1. Под контрольной серией сапного антигена понимают серию, апробированную для этой цели Всесоюзным государственным научно-контрольным институтом ветеринарных препаратов Госагропрома СССР и используемую в течение срока ее годности.
2. Под референс-препаратом сапной сыворотки понимают апробированную Всесоюзным государственным научно-контрольным институтом ветеринарных препаратов Госагропрома СССР серию сапной сыворотки или полиглобулин, выделенный из этой сыворотки, с установленной биологической активностью по содержанию единиц активности (ЕАрп), используемую в пределах установленного срока годности.
3.4.2. Подготовка к испытанию
3.4.2.1. Готовят физиологический раствор рН 6,8-7,2.
3.4.2.2. Готовят последовательным разведением раствора референс-препарата сапной сыворотки с содержанием в 1 см 3.4.2.3. Готовят разведения на физиологическом растворе испытуемого антигена 1:50, 1:100, 1:200, 1:300, 1:400 и контрольной серии антигена 1:100.
3.4.2.4. В соответствии с требованиями ГОСТ 16446-78 на комплемент готовят гемолитическую систему, состоящую из равных объемов 2,5%-ной взвеси эритроцитов и раствора гемолизина в рабочем разведении. Полученную гемсистему помещают в водяную баню при 37°С на 20 мин для сенсибилизации эритроцитов.
Для применения в реакции комплемент берут в количестве на два интервала большем его титра. Так, например, при титре комплемента 0,19 его рабочая доза будет 0,25.
Затем готовят 40 см 3.4.3. Проведение испытания
Разведения антигена, сывороток и комплемент разливают в указанной последовательности по 0,5 см Таблица 2
Схема и результаты постановки РСК (пример)
Доза референс-препарата сапной сыворотки, ЕАрп
Степень задержки гемолиза эритроцитов при разведении испытуемой серии антигена, %