Практическая биология для олимпиадников. Под редакцией Д. А. Решетова Составитель П. В. Волошина

2 УДК 57 ББК 28.0 П69 Рецензенты: Д. М. Никитин, А. И. Ломакин, С. А. Горин П69 Практическая биология для олимпиадников. Под ред. Д. А. Решетова М.: МЦНМО, с. ISBN Данное учебное пособие посвящено подготовке к практическому туру регионального и заключительного этапа Всероссийской олимпиады школьников по биологии. Книга содержит двенадцать разделов, каждый из которых посвящён подготовке к соответствующему «кабинету» практического тура олимпиады. Практический тур считается сложнее теоретического и содержит немало элементов, которые отсутствуют в школьной программе. В пособии даются необходимые теоретические и практические сведения для выполнения заданий олимпиад, разбираются примеры заданий, а также рассматриваются основные трудности и ошибки, связанные с их выполнением. В учебнике приводятся схемы и иллюстрации, способствующие более эффективному усвоению материала. Все авторы учебника так или иначе связаны с подготовкой к Всероссийской олимпиаде по биологии. Мы надеемся, что данная книга станет надёжным помощником для школьников, которые увлечены биологией и хотят побеждать в олимпиадах. ББК 28.0 Редактор П. В. Волошина 12+ ISBN Авторы, МЦНМО, 2017.

3 Содержание Биосистематика (В. И. Гмошинский) Подготовка к работе Приготовление микропрепаратов Работа с микроскопом Зарисовка предложенных объектов Современные взгляды на систему органического мира Приложение 1. Краткая характеристика основных отделов грибов и водорослей Приложение 2. Рекомендации по выполнению заданий олимпиады.. 30 Список литературы Биохимия (Е. Д. Зотова, В. Н. Лавренова) Введение Методы выделения и очистки белков Качественные реакции Количественное определение веществ Ферментативная кинетика Список литературы Микробиология (Е. С. Звонарёва) Метод микроскопии Приготовление микробиологических препаратов Определение физиолого-биохимических свойств бактерий Список литературы Клеточная биология (Е. В. Шеваль, С. А. Голышев) Методы клеточной биологии Строение клеток Клеточные процессы Список литературы Гистология (О. С. Ганчарова) Общая информация Гистологическая техника Анализ гистологических препаратов Определение типа ткани и заполнение бланка ответов Самостоятельная подготовка к решению гистологических задач Список литературы Ботаника высших растений (Н. А. Вислобоков) Морфология высших растений Анатомия высших растений Список литературы

4 4 Содержание Физиология растений (С. А. Кузнецова) Разделение пигментов и качественные реакции с ними Растительная клетка как осмотическая система Наблюдение за движениями устьиц Приложение. Физические принципы осмотических явлений Список литературы Анатомия беспозвоночных (М. В. Тиунова) Введение Краткий обзор инструментов, используемых для вскрытия и препаровки животных Вскрытие двустворчатого моллюска (беззубки) и анализ его строения Вскрытие ракообразного (речного рака) и анализ его строения Вскрытие насекомого (таракана) и анализ его строения Список литературы Анатомия позвоночных (Е. М. Литвинова) Морфология черепов Морфология зубов Строение черепов и зубов у основных отрядов млекопитающих Список литературы Анатомия человека (И. М. Синёва) Терминология Остеология учение о костях Артрология учение о соединениях костей Заключение Список литературы Физиология человека (Д. А. Сутормин, А. Р. Гафуров, Л. А. Абовян) Электрофизиология Рефлексы сердечно-сосудистой системы Рефлексы дыхательной системы Зрительные рефлексы Группы крови человека Методы неинвазивного исследования человека Диагностика и терапия неотложных состояний в медицине Список литературы Генетика (А. Р. Лавренов, И. В. Кузьмин) Закономерности наследования Взаимодействие аллелей Хромосомная теория наследственности. Сцепленное наследование генов Методχ Взаимодействие неаллельных генов Популяционная генетика. Закон Харди Вайнберга Советы по решению олимпиадных задач Список литературы Об авторах

5 БИОСИСТЕМАТИКА Автор: В. И. Гмошинский На экспериментальном туре в кабинете биосистематики конкурсантам предлагается определённый набор из разнообразных организмов. В большинстве случаев предложенный материал может быть представлен пробирками и чашками Петри, содержащими исследуемые образцы, а также фрагменты разнообразных субстратов, обычно это высушенные листья растений, покрытых разнообразным по структуре налётом. 1. Подготовка к работе Для работы в кабинете биосистематики обычно требуется определённый набор инструментов, которые будут размещены на столе. Как правило, он выглядит следующим образом 1 : 1) микроскоп, 2) предметные стёкла и покровные стёкла, 3) препаровальные иглы (обычно 2 шт.), 4) ёмкость с водой 2, 5) пипетка, 6) пинцет, 7) кусочки фильтровальной бумаги, 8) пробирки, чашки Петри или конверты с исследуемыми образцами. Также возможно присутствие на рабочем месте микрофотографий, которые будут использоваться при выполнении последующих заданий. Прежде чем приступить к выполнению задания, настоятельно рекомендуем вам проверить работоспособность выданного микроскопа. Для этого включите подсветку (или настройте свет при помощи зеркала). Проверьте работоспособность макро- и микровинта (ручки должны крутиться без усилия, плавно и беззвучно), а также наличие и работоспособность диафрагмы (плавно закрывается и открывается). К сожалению, в некоторых случаях у микроскопа бывает повреждён или загрязнён объектив или окуляр, тогда при работе изображение выглядит расплывчатым. В этом случае окуляр микроскопа можно протереть мягкой тканью, а если это не помогает, то необходимо подозвать преподавателя, поскольку неосторожная попытка очистить объектив может легко привести к его необратимому повреждению. 1 В зависимости от набора объектов перечень инструментов может изменяться. 2 В некоторых случаях для приготовления препаратов гидрофобных объектов (спор грибов и миксомицетов) используют не воду, а молочную кислоту или 2 %-й или 4 %-й раствор KOH.

6 6 Биосистематика Кроме того, настоятельно рекомендуем вам соблюдать меры безопасности при работе с живым и фиксированным материалом. Следует помнить, что данная работа не совместима с употреблением напитков и продуктов питания, поскольку это может быть опасным для жизни. После взятия пробы пробирки, чашки Петри и конверты необходимо по возможности плотно закрывать. Это требование обусловлено тем, что споры большинства грибов, не являясь патогенными для человека, при вдыхании могут вызывать сильные аллергические реакции. Поэтому при взятии образца мицелия из чашки Петри её только немного приподнимают с одной стороны и аккуратно достают образец, после чего чашку сразу же закрывают. Некоторые образцы могут быть зафиксированы в формалине (обычно 2 % или 4 % формальдегида, он же метиленгликоль). Это чрезвычайно токсичное вещество. Ни в коем случае нельзя допускать его попадания на кожу или в глаза. Если это всё-таки произошло, необходимо как можно быстрее смыть его большим объёмом воды. Если вы разлили пробирку с фиксированной пробой, необходимо срочно подозвать преподавателя, поскольку пары формальдегида также могут быть токсичны. 2. Приготовление микропрепаратов Приготовление микропрепарата требует аккуратности. Здесь мы постараемся привести общий алгоритм действий в зависимости от структуры предложенного вам материала. 1. Образец представляет собой пробирку с более или менее гомогенным осадком на дне. Пробирку аккуратно, не встряхивая, открывают. После этого при помощи пипетки забирают небольшой объём осадка со дна и помещают его на чистое и сухое предметное стекло. Затем препарат накрывают покровным стеклом. 2. Образец представляет собой нити или небольшие кустики в пробирке. На предметное стекло (при помощи пипетки) наносят небольшую каплю воды. Далее пинцетом или препаровальными иглами подцепляют небольшой фрагмент нити или кустика и помещают его в каплю воды на предметном стекле. Если фрагмент образца слишком большой, чтобы накрыть его покровным стеклом, при помощи препаровальных иголок и пинцета необходимо удалить лишние фрагменты. Обычно хорошие препараты получаются из сравнительно небольших кусочков нитей, поскольку, если на стекло нанесён слишком крупный фрагмент, в препарате получается хаотичное сплетение нитей, в котором невозможно рассмотреть необходимые структуры. 3. Образец представляет собой чашку Петри, в которой на агаризованной питательной среде находятся волокнистые структуры.

7 2. Приготовление микропрепаратов 7 На предметное стекло наносят небольшое количество воды 1. Немного приоткрывают чашку Петри и при помощи препаровальной иглы аккуратно подцепляют волокнистый налёт с поверхности чашки. При этом нужно быть чрезвычайно аккуратным и ни в коем случае не зацепить фрагмент агара, поскольку в препарате он будет выглядеть как расплывшееся пятно, не позволяющее рассмотреть строение объекта. Далее при помощи препаровальной иглы нужно распределить нити по предметному стеклу и постараться максимально смочить их водой. Этого можно добиться аккуратным постукиванием по ним иголкой. Если вы видите, что эти действия приводят к очень сильным разрывам и деформации нитей, то продолжать их не стоит. 4. Образец представляет собой чашку Петри, в которой на агаризованной питательной среде находятся влажные капельки или борозды. На предметное стекло наносят небольшую каплю воды. Приоткрывают крышку чашки Петри и аккуратно, не подцепляя агар, дотрагиваются до слизистой капельки. После этого иголку переносят в каплю воды на предметном стекле. Скорее всего, вы не увидите образца на предметном стекле невооружённым глазом, так как клетки равномерно распределятся по капле воды, но в некоторых случаях она может стать немного более мутной. После этого каплю воды накрывают покровным стеклом. 5. Образец представлен фрагментом коры дерева, листом высшего растения или каким-либо другим фрагментом субстрата с налётом разного цвета. На предметное стекло наносят небольшую каплю воды. Проводя иголкой несколько раз, счищают налёт (иголку при этом стараются держать под тупым углом к поверхности субстрата). В некоторых случаях бывает полезно немного смочить иголку. При этом ни в коем случае нельзя нажимать на иголку и держать её под острым углом к поверхности образца, поскольку в этом случае вы разрушите хрупкий лист или фрагменты древесины, в результате чего на стекле вместо исследуемого образца окажутся фрагменты субстрата, с которого вы его снимали. Скорее всего, невооружённым глазом вы не увидите большого количества нитей мицелия гриба или клеток водорослей в капле воды. Образец также накрывают покровным стеклом. 6. Образец представляет собой колос злака, в котором вместо семян находится чёрный порошок. На предметное стекло наносят каплю воды, смачивают ей препаровальную иглу и дотрагиваются до чёрного содержимого колоса. После этого иглу погружают в каплю воды на 1 В этом случае даже лучше использовать масляную кислоту или 2 4 %-й раствор KOH, если они присутствуют в предлагаемом вам наборе, поскольку в большинстве случаев выглядящий подобным образом образец относится к грибам, у которых зачастую встречаются гидрофобные (не смачиваемые водой) споры.

8 8 Биосистематика предметном стекле. Процедуру можно повторить 2 3 раза. Образец накрывают покровным стеклом. 7. Образец представляет собой раздавленное семя высшего растения, покрытое белыми волокнами. На предметное стекло наносят каплю воды. При помощи пинцета или препаровальной иглы забирают небольшой фрагмент волокон с поверхности семени и помещают его в каплю воды. После этого его накрывают покровным стеклом. Для того чтобы препарат получился правильно и вы смогли рассмотреть все особенности строения предложенных объектов, необходимо соблюдать несколько простых правил. 1. Не используйте слишком большое количество воды, поскольку, если её будет слишком много, она может выступить по краям предметного стекла и попасть на его поверхность, что при работе на большом увеличении может привести к погружению в неё объектива микроскопа, а этого ни в коем случае допускать нельзя. Если после накрывания препарата покровным стеклом вы видите, что по краям начинает выступать жидкость, обязательно уберите её при помощи фильтровальной бумаги. Если, наоборот, жидкости под стеклом недостаточно, то её можно добавить, поместив небольшую каплю воды с краю от покровного стекла. Вода сама затечёт под покровное стекло. Остатки воды уберите также при помощи фильтровальной бумаги. 2. Не помещайте в препарат большие фрагменты исследуемого образца, поскольку это приводит к тому, что на стекле можно будет наблюдать только плотные сгустки или сплетение нитей, в то время как никаких морфологических особенностей вам увидеть не удастся. 3. Старайтесь избегать образования большого количества воздушных пузырьков под стеклом. Для этого препарат нужно накрывать стеклом медленно и под углом, чтобы лишний воздух мог выйти. В некоторых случаях для этого удобно использовать препаровальную иглу (рис. 1). Рис. 1. Способ накрывания препарата покровным стеклом с использованием препаровальной иглы

9 3. Работа с микроскопом 9 3. Работа с микроскопом Основные приёмы работы с микроскопом подробно описаны во множестве учебных пособий. Здесь имеет смысл остановиться на наиболее грубых и широко распространённых ошибках при микроскопировании. 1. Можно переводить объективы с одного увеличения на другое, не меняя фокусное расстояние. Достаточно часто можно видеть, как при переводе с одного увеличения на другое учащиеся сначала полностью поднимают объектив (или, в зависимости от модели микроскопа, опускают вниз столик), после чего мучительно пытаются подобрать нужное фокусное расстояние на бóльшем увеличении. Этого делать не нужно. Объективы исправного микроскопа расположены так, что при переводе с одного увеличения на другое вы не сможете сдвинуть или как-либо задеть покровное стекло. Если объектив всё-таки смещает покровное стекло, обратитесь к преподавателю, так как есть вероятность, что микроскоп неисправен. 2. При обычных режимах микроскопирования конденсор должен быть поднят наверх. Для изменения интенсивности освещения пользуйтесь диафрагмой. При микроскопировании нужно найти своеобразный баланс между яркостью и контрастностью линий объекта. Если диафрагма открыта, то через неё проходит больше света, однако он более рассеянный, в результате чего края объекта как бы «расплываются». Чем сильнее закрыта диафрагма, тем более точечный источник освещения вы получаете, и таким образом, граница объекта становится более чёткой, а общая освещённость препарата падает. При работе с диафрагмой нужно найти баланс между интенсивностью освещения и чёткостью граней объекта. 3. Никогда не вынимайте препарат, если микроскоп установлен на большое увеличение. Когда микроскоп установлен на большое увеличение ( 40 и 100), расстояние между объективом и покровным стеклом очень небольшое. Поэтому при извлечении препарата вы можете задеть покровным стеклом объектив, что в свою очередь может привести к возникновению царапин на его поверхности, а следовательно, к необратимому выходу из строя. 4. Зарисовка предложенных объектов Иногда задания олимпиады предполагают зарисовку полученных объектов, а именно изображение строения вегетативного тела и структур, связанных с размножением. Постарайтесь внимательно рассмотреть объект. Если вам примерно удастся узнать его таксономическое положение, это сильно облегчит процесс зарисовки. Если узнать объект не получается, постарайтесь

10 10 Биосистематика найти какие-либо хорошо дифференцированные структуры, которые могли бы отражать особенности строения вегетативного тела и/или органов размножения. Обычно объекты предлагается зарисовывать в специально отведённые для этого рамки в бланке ответа. Для выполнения рисунка лучше всего выбирать механический карандаш с мягким или твёрдо-мягким грифелем (с маркировкой B или HB). Рисунок должен быть крупным и располагаться примерно по центру рамки в бланке ответа. Для того чтобы «попасть» в размер рисунка, необходимо предварительно нанести контур объекта тонкими линиями, чтобы отметить на листе основные пропорции объекта (рис. 2). В некоторых случаях объекты бывают Рис. 2. Последовательные стадии изготовления рисунка водоросли рода Closterium симметричны, тогда имеет смысл нанести на заготовку рисунка оси симметрии. Наметьте без сильного нажима на карандаш основные линии объекта и убедитесь в том, что полученное вами изображение по пропорциям соответствует исследуемому объекту. После этого можно переходить к обводке. Линии должны быть тонкими и чёткими. Не рекомендуется заштриховывать и раскрашивать объект. В некоторых случаях объём рисунку можно придать при помощи точкования, однако из-за того, что эта техника занимает слишком много времени, при выполнении заданий олимпиады применять её неудобно. Если на рисунке предполагаются подписи, то их также следует делать простым карандашом (ни в коем случае не используйте для этого ручки (!)), стараясь, чтобы идущие от них линии не пересекались. В углу рисунка обычно указывают увеличение, при котором был зарисован объект. 5. Современные взгляды на систему органического мира Значительное число вопросов в заданиях раздела «биосистематика» рассчитано на знание современной системы органического мира, характеристик основных представителей и умении «узнать» предложенный вам объект.

11 5. Современные взгляды на систему органического мира 11 Успешное выполнение многих заданий раздела «Биосистематика» связано со знанием современных представлений о системе органического мира, которые имеются далеко не во всех школьных учебниках по биологии. Поэтому ниже мы приводим перечень основных макротаксонов с краткими характеристиками, а также перечнем основных представителей. Поскольку раздел «Биосистематика» предполагает работу с живым или фиксированным материалом, некоторые группы организмов могут быть доступнее для организаторов олимпиады и чаще использоваться в заданиях. При подготовке им следует уделить особое внимание. Такие роды отмечены знаком. В большинстве современных работ таксонам высоких рангов обычно не присваивают таксономический статус, а говорят о кладах, т. е. группах родственных организмов (рис. 3). Для удобства восприятия в настоящем пособии мы условно присваиваем каждому таксону определённый таксономический статус, однако следует учесть, что в разных литературных источниках уровни таксонов могут различаться. Рис. 3. Система органического мира по работе [5] с изменениями. На схеме приведены филогенетические связи между мега-группами. Домен Archaea Археи. Исключительно одноклеточные прокариотические организмы с гистон-подобными белками в геноме. Ли-

12 12 Биосистематика пидный компонент мембраны из фитанолглицеридов. Мембраны могут быть однослойными. Клеточная стенка состоит из псевдомуреина и/или S-протеинов. Жгутик представлен сплошной белковой нитью, образованной субъединицами флагеллинов B1, B2, B3, левовращающий. Экология: экстремофилы (галофилы, ацедофилы, алколофилы, барофилы и т. д.). Рис. 4. Амфиесма динофитовых водорослей состоит из текальных везикул (2), которые могут быть заполнены полисахаридами, расположенными под плазмолеммой (1) Рис. 5. Строение пелликулы эвгленовых водорослей. Под плазмолеммой (1) находятся белковые пластинки (2), под которыми располагаются микротрубочки (3), обеспечивающие их подвижность. Кроме того, с каждой пластинкой ассоциированы слизистые тела (мукоцисты) (4), играющие роль в подвижности клетки, формировании домиков и др. Рис. 6. Строение жгутиков охрофитовых водорослей. А внешний вид гамет Fucus sp. с двумя жгутиками неравной длины: длинным перистым (покрытым двумя рядами трёхчастных мастигонем) и коротким гладким; Б cхема строения трёхчастной мастигонемы. Обозначения: 1 волосок, 2 трубчатая часть, 3 базальное вздутие

13 5. Современные взгляды на систему органического мира 13 Рис. 7. Строение поперечного жгутика динофитовых водорослей (по работе Hoek C. van den et al., 1995 г. с изменениями). А поперечный разрез; Б внешний вид жгутика. Обозначения: 1 спирально закрученная аксонема, 2 чехол поперечного жгутика, 3 параксиальный тяж Рис. 8. Схема поперечного разреза жгутиков эвгленовых водорослей. Обозначения: 1 параксиальный тяж; 2 аксонема Домен Bacteria Бактерии. Одноклеточные, колониальные или многоклеточные организмы с начальной дифференцировкой клеток (до 4 функциональных типов). Прокариотическое строение клеток. Геном не содержит гистонов. Мембраны всегда двухслойные из фосфолипидов. Клеточная стенка из муреина и/или S-протеинов и разнообразных полисахаридов. Жгутик полая белковая нить из субъединиц флагеллина А, правовращающий. Способны к оксигенному фотосинтезу. Явились «прородителями» хлоропластов. Хлорофилл в разных сочетаниях: a; a и b; a и c; a и d. Экология: обитают повсеместно, преобладают при нормальной температуре, давлении и оксигенации. (Merismopedia (рис. 9 А), Microcystis (рис. 9 Б, В), Nostoc (рис. 9 Г), Anabaena (рис. 9 Д), Oscillatoria (рис. 9 Е).) Домен Eukarya Эукариоты. Одноклеточные, колониальные и многоклеточные организмы, в том числе с глубокой дифференцировкой клеток и наличием тканей и органов. Эукариотическое строение клетки. Ядро содержит гистоны. Мембраны из фосфолипидов, двухслой-

14 14 Биосистематика Рис. 9. Разнообразие цианобактерий. А Merismopedia колония в слизистом чехле (4); Б Microcystis внешний вид колонии под малым увеличением микроскопа; В Microcystis фрагмент колонии под большим увеличением, клетки погружены в слизь (4) и содержат газовые вакуоли (3); Г Nostoc нить вегетативных клеток с толстостенными гетероцистами (1), отвечающими за процесс фиксации азота; Д Anabaena нить с гетероцистами (1) и акинетами (2); Е Oscillatoria фрагмент нити ные. Клеточная стенка, если имеется, состоит из целлюлозы, хитина, хитозана, пектинов, маннанов, галактанов и др. Жгутик представлен аксонемой, окружённой мембраной, движется волнообразно. Экология: обитают повсеместно, преобладают при нормальной температуре, давлении и оксигенации. Субдомен Excavata. Только одноклеточные микроскопические особи. Жгутики 1, 2, 3, 4, 6, 8 или, равные, передние или боковые, часто билатеральные или собранные в венчик. Митохондрии с дисковидными кристами или отсутствуют. Хлоропласты только у некоторых эвглен, трехмембранные. Хлорофиллы a и b. Половой процесс первично отсутствует. Надцарство Excavata. Характеристика надцарства повторяет характеристику субдомена. Царство Metamonada. (Giardia, Trichomonas, Oxymonas.) Царство Discoba. Эвгленовые водоросли (Euglena*), акразиевые слизевики (Acrasis), гетеролобозные амёбы (Naegleria), кинетопластиды (Trypanosoma*, Leishmania*). Субдомен Diaphoretikes (= Bikonta). Большинство представителей имеют два жгутика. При этом для данной группы они являются первичными.

15 5. Современные взгляды на систему органического мира 15 Надцарство SAR (Stramenopiles + Alveolata + Rhizaria). Одноклеточные, колониальные, плазмодиальные, многоклеточные формы, могут образовывать ткани и органы. Микроскопические или макроскопические. Жгутики неравные, у Stramenopiles покрыты двумя рядами трёхчастных мастигонем, у других представителей могут быть утолщены за счёт белковых тяжей и у динофитовых водорослей. Митохондрии с трубчатыми кристами. У охрофитовых водорослей (Ochrophyta) хлоропласты четырёхмембранные, у динофитовых водорослей (Dinophyta) трехмембранные. Хлорофилл в разных сочетаниях: a и b; a и c. Царство Rhizaria. Церкомонады (Cercomonas), голые филозные амёбы (Vampyrella), плазмодиофориды (Plasmodiophora*), хлорарахниофитовые водоросли (Chlorarachnion), фораминиферы (Reticulomyxa*), радиолярии (Eucyrtidium*). Царство Stramenopiles (= Chromista). Оомицеты (Saprolegnia* (рис. 10), Phytophthora*, Peronospora*, Plasmopara*), лабиринтуловые слизевики (Labyrinthula), охрофитовые водоросли (Dinobryon*, Hydrurus*, Sunura*, Vaucheria*, Tribonema* (рис. 11), Fucus* (рис. 12), Laminaria* (рис. 13), Ectocarpus* (рис. 14), Pinnularia*(рис. 15 А), Navicula*(рис. 15 Б), Nitzschia*, Melosira* (рис. 16)). Рис. 10. Saprolegnia. Оогонии с оосферами (А) и зооспорангии (Б) Рис. 11. Tribonema. Клетки состоят из двух половинок, поэтому на конце имеется «вилочка» (А), а при полном разрушении нитей остаются Н-образные фрагменты (Б)

16 16 Биосистематика Рис. 12. Fucus vesiculosus. А внешний вид таллома; Б строение фрагмента таллома. Обозначения: 1 воздушный пузырёк, 2 рецептакул со скафидиями, 3 центральная жилка, 4 подошва Рис. 13. Laminaria saccharina ( = Saccharina latissima), внешний вид. Обозначения: 1 ризоиды, 2 «черешок», 3 листовая пластина

17 5. Современные взгляды на систему органического мира 17 Рис. 14. Ectocarpus sp., внешний вид. А многогнездный гаметангий; Б внешний вид; В одногнездный спорангий Рис. 15. Пеннатные диатомовые водоросли родов Pinnularia (А) и Navicula (Б), вид со створки. Обозначения: 1 каналовидный шов, 2 штрихи; 3 центральный узелок, 4 терминальный узелок Рис. 16. Центрическая диатомовая водоросль Melosira, фрагмент таллома (вид с пояска)

18 18 Биосистематика Царство Alveolata. Динофитовые водоросли (Ceratium* (рис. 17), Peridinium* (рис. 18), Noctiluca*), инфузории (Paramecium*), споровики (Plasmodium*, Toxoplasma*, Gregarina*). Рис. 17. Ceratium. Вид со «спинной» (А) и «брюшной» (Б) стороны. Обозначения: 1 эпивальва, 2 поперечная борозда (цингулюм), 3 гиповальва, 4 продольная борозда Рис. 18. Peridinium. Внешний вид клетки с «брюшной» (А) и «спинной» (Б) стороны. Обозначения: 1 эпивальва, 2 поперечная борозда (цингулюм), 3 гиповальва, 4 продольная борозда, 5 продольный жгутик

19 5. Современные взгляды на систему органического мира 19 Надцарство Hacrobia 1. Одноклеточные или колониальные. Живут в пресных или солёных водах. Клетки имеют два неравных по длине жгутика, иногда покрытых волосками различного строения. Митохондрии с пластинчатыми или трубчато-пластинчатыми кристами. Хлоропласты, если есть, четырехмембранные. Царство Hacrobia. Криптофитовые водоросли (Cryptomonas), примнезиофитовые водоросли (Prymnesium), кокколитофориды (Coccolithus), солнечники (Acanthocystis*). Надцарство Archaeplastida. Это первая группа, которая использовала бактерий для осуществления фотосинтеза. Одноклеточные, колониальные, многоклеточные формы (включая представителей с органами и тканями). Обитают повсеместно. Жгутиковый аппарат: 2 передних жгутика, реже 4 или много. Митохондрии с пластинчатыми кристами. Хлорофиллы: a (Glaucocystophyta, Rhodophyta), a, b (Viridiplantae). У Glaucocystophyta, Rhodophyta присутствуют фикобилины. У Glaucocystophyta хлоропласты сохранили муреиновую клеточную стенку. Царство Glaucophyta. Глаукофитовые водоросли (Glaucocystis, Cyanophora). Царство Rhodophyta. Красные водоросли (Porphyra*, Batrachospermum* (рис. 19), Ceramium*, Polysiphonia* (рис. 20), Phyllophora*, Gelidium*, Ahnfeltia*). Рис. 19. Пресноводная водоросль Batrachospermum: в клетках отсутствует фикоэритрин, имеет сине-зелёную окраску 1 В некоторых случаях царство Hacrobia объединяют с группой Archaeplastida в кладу AH [6], которая по рангу приблизительно равна SAR. При этом в работе Эдла с соавторами [5] они приводятся как группы inscertae sedis, т. е. с неясным таксономическим положением.

20 20 Биосистематика Рис. 20. Polysiphonia. Внешний вид фрагмента таллома Царство Viridiplantae (= Choroplastida, Plantae sensu stricto). Харовые водоросли (Chara* (рис. 21), Spirogyra* (рис. 22), Netrium*, Desmidium*, Micrasterias* (рис. 23), Cosmarium*, Closterium (рис. 2)*), зелёные водоросли (Ulothrix* (рис. 24), Codium*, Acetabularia*, Cladophora*, Trentepohlia* (рис. 1 цветной вклейки), Chlamydomonas*, Volvox*, Hydrodictyon*, Scenedesmus*, Oedogonium*,Chlorella*), высшие растения (множество различных родов*). Рис. 21. Chara. Внешний вид таллома (А) и фрагмент нити второго порядка (Б). Обозначения: 1 узел на побеге первого порядка, 2 междоузлие побега первого порядка, 3 клубеньки на ризоидах (4), 5 побеги второго порядка, 6 узел побега второго порядка, 7 междоузлие побега второго порядка, 8 побег третьего порядка, 9 оогоний, 10 антеридий, 11 двояковыпуклая клетка побега второго порядка, 12 клетки коры

21 5. Современные взгляды на систему органического мира 21 Рис. 22. Spirogyra. Фрагмент таллома. Заметен один характерный спирально закрученный лентовидный хлоропласт. В некоторых случаях, в одной клетке может быть сразу несколько подобных структур Рис. 23. Micrasterias. Клетка разделена на две половинки выемкой (синус) (1), ядро (2) находится в центральной части, в цитоплазме заметно большое количество пиреноидов (3) Рис. 24. Ulothrix. Внешний вид таллома. Хлоропласты располагаются в клетке в виде незамкнутого кольца, поэтому с краёв они окрашены сильнее, чем в центральной части

22 22 Биосистематика Субдомен Amorphea (= Unikonta) аморфеи = униконты. Надцарство Apusozoa 1. Исключительно одноклеточные формы. Обитают в пресных и солёных водоёмах, в почве. Два или несколько гладких жгутиков. Кристы митохондрий разных типов. Хлоропласты отсутствуют. Царство Apusozoa апузозои. Свободноживущие амёбы (Breviata) и жгутиконосцы (Ancyromonas). Надцарство Amoebozoa. Одноклеточные, колониальные, плазмодиальные формы. Обитают в почве. Имеют два гетероконтных и изоморфных жгутика. Митохондрии трубчатые, ветвистые, иногда утрачены. Хлоропласты отсутствуют. Царство Amoebozoa амебозои. Лобозные амёбы (Amoeba*), дискозеи (Endostelium), архамебы (Mastigamoeba, Pelomyxa), настоящие слизевики (Dictyostelium, Protostelium, Lycogala*, Trichia*, Fuligo*, Stemonitis*). Надцарство Opisthokonta. Одноклеточные, колониальные и многоклеточные формы, включая организмы с тканями и органами. Обитают повсеместно. Жгутиковый аппарат с одним задним жгутиком (исключения Neocallymаstix, Mastotermes с большим числом задних жгутиков). Митохондрии с пластинчатыми кристами. Хлоропласты отсутствуют. Царство Holomycota = Nucletmycea = Настоящие грибы. Mucor* (рис. 25 А, Б), Rhizopus* (рис. 25 В), Saccharomyces* (рис. 26), Penicillium* (рис. 27 А, рис. 2 цветной вклейки), Aspergillus* (рис. 27 Б), Eurotium*, Neosartorya*, Sordaria*, Claviceps* (рис. 28), Peziza* (рис. 29 Б), Helvella*, Morchella* (рис. 29 А), Verpa*, Gyromitra* (рис. 29 В), Tuber*, Sclerotinia*, Microsphaera*, Puccinia*, Ustilago*, Tilletia*, Exidia*, Fomes*, Fomitopsis*, Polyporus*, Agaricus*, Amanita*, Russula*, Boletus*, Leccinum*), лихенизированные грибы (= лишайники): Collema*, Physcia*, Graphis*, Xanthoria*, Usnea*, Cladonia* (см. рис. 3 цветной вклейки). Царство Holozoa настоящие животные (множество различных родов*). Кроме того, мы советуем вам при подготовке к олимпиаде обратиться к специализированной англоязычной [5] и русскоязычной литературе [4] по систематике. Характеристики большинства объектов, отмеченных знаком, вы можете найти в учебных пособиях [1, 2, 3]. 1 В работе С. Эдла с соавторами [5] представители Apusozoa приведены как incertae sedis, т. е. группа с неясным таксономическим положением. Их положение в данной системе приведено в соответствии с работой Т. Кавалир-Смитта с соавторами [8]

23 Приложение 1. Краткая характеристика основных отделов грибов Рис. 25. Строение спорангиеносцев. Представители рода Mucor с крупным (А) и мелким (Б) воротничком. Представители рода Rhizopus (В). Обозначения: 1 колонка, 2 воротничок, 3 спорангиеносец Рис. 26. Внешний вид клеток дрожжей Saccharomycodes. А почкующиеся клетки; Б сумка с четырьмя аскоспорами Рис. 27. Строение анаморфных (бесполых) органов спороношения грибов родов Penicillum (А) и Aspergillus (Б). Обозначения: 1 цепочки конидий, 2 фиалиды, 3 метулы, 4 конидиеносец, 5 вегетативный мицелий

24 24 Биосистематика Рис. 28. Claviceps purpurea. А внешний вид поражения с псевдосклероциями (1); Б псевдосклероций (1), проросший головчатой стромой (2) Рис. 29. А Morchella conica; Б Peziza varia; В Gyromitra esculenta Приложение 1. Краткая характеристика основных отделов грибов и водорослей Очень часто в задании по бисистематике учащимся предлагаются объекты, которые в той или иной степени можно отнести к водорослям или грибам. Поэтому для успешного выполнения заданий необходимо знать характеристики основных таксономических групп данных организмов.

25 Приложение 1. Краткая характеристика основных отделов грибов Краткая характеристика основных отделов грибов Грибы (Holomycota) это царство живой природы, объединяющее эукариотические организмы, сочетающие в себе признаки как животных, так и растений. На сегодняшний день выделяют 5 основных отделов царства Holomycota, сравнительная характеристика которых приведена в таблице 2. Та б л и ц а 1. Сравнительная характеристика грибов (царство Holomycota) и псевдогрибов (царство Stramenopiles) Признак Псевдогрибы Грибы Вегетативное тело Питание Мицелий Гетеротрофы с осмотическим типом питания Клеточная стенка Целлюлоза Хитин и другие полисахариды Запасной продукт Миколаминарин Гликоген Жгутики Кристы митохондрий Аппарат Гольджи Синтез лизина Два жгутика: гетероконтные, гетероморфные, длинный с двумя рядами трёхчастных мастигонем, короткий гладкий Трубчатые Нормально развит Растительный путь (через диаминопимелиновую кислоту) Имеется только у представителей отдела Chytrydiomycota, задний, гладкий Пластинчатые Редуцирован до одной диктиосомы Животный путь (через аминоадипиновую кислоту) Поскольку в заданиях по биосистематике учащимся часто предлагаются в качестве объекта представители псевдогрибов, мы приводим их сравнительную характеристику с настоящими грибами. 2. Краткая характеристика основных отделов водорослей Водоросли по большей части водные организмы, большинство из которых фотоавтотрофы, их вегетативное тело лишено проводящих систем и представлено талломом, и у них отсутствуют многоклеточные органы размножения (за исключением класса Charophyceae). Таким образом, водоросли это не таксономическая, а экологическая группа, объединяющая в себе целый ряд неродственных организмов. В таблице 3 мы приводим сравнительную характеристику наиболее широко распространённых отделов водорослей.

26 Та б л и ц а 2. Сравнительная характеристика основных отделов грибов Признак Chytridiomycota Glomeromycota Zygomycota Ascomycota Basidiomycota Вегетативное тело Жгутиковые стадии Вегетативное размножение Бесполое размножение Тип полового процесса Тип жизненного цикла Одноклеточный или многоклеточный ризомицелий Один гладкий задний жгутик Фрагментация мицелия Эндогенные споры в спорангиях Изогамия, гетерогамия, оогамия, хологамия Гаплобионтный с зиготической редукцией Многоядерный, несептированный Многоядерный, несептированный. Могут переходить в форму дрожжей и образовывать псевдомицелий Многоклеточный, септированный; септы простые; могут образовываться тельца Воронина. Могут переходить в форму дрожжей и образовывать псевдомицелий Нет Нет Нет Нет Фрагментация мицелия Эндогенные споры в спорангиях Половой процесс неизвестен Неизвестен Фрагментация мицелия, почкование у дрожжей Эндогенные споры в спорангиях Зигогамия Гаплобионтный с зиготической редукцией Фрагментация мицелия, почкование у дрожжей Многоклеточный, септированный. Септы могут быть простые, но слоистые с тельцами Воронина или долипоровые, иногда с парентосомами. Могут переходить в форму дрожжей и образовывать псевдомицелий Фрагментация мицелия, почкование у дрожжей Экзогенные споры конидии Экзогенные споры конидии Соматогамия, гаметангиогамия Продолжительная гаплоидная фаза сменяется короткой, трофически не самостоятельной дикариотической, после чего происходит редукционное деление и образуются эндогенные половые продукты аскоспоры в сумках (асках) Соматогамия, сперматизация Продолжительная гаплофаза сменяется ещё более продолжительной дикариофазой. При формировании половых продуктов происходит слияние ядер и образуются экзогенные половые продукты базидиоспоры на базидиях 26 Биосистематика

27 Та б л и ц а 3. Сравнительная характеристика основных отделов водорослей Признак/Отдел Cyanophyta Rhodophyta Положение в системе Домен Bacteria (прокариоты, геном в виде кольцевой молекулы ДНК, гистоны отсутствуют) Экология Обитают повсеместно Типы дифференциации талломов Коккоидный, нитчатый, разнонитчатый, псевдопаренхиматозный Царство Rhodophyta Морские, редко пресноводные Коккоидный, нитчатый, разнонитчатый, псевдопаренхиматозный Chlorophyta в широком Ochrophyta Dinophyta Euglenophyta смысле 1 Царство Viridiplantae Обитают повсеместно Все типы организации таллома, кроме амёбоидного Царство Stramenopiles Обитают повсеместно Все типы дифференциации таллома, кроме сифонокладального Царство Alveolata Морские, реже пресноводные Монадный, реже амёбоидный или коккоидный. Характерно дорзовентральное строение клетки (рис. 17, 18) Царство Discoba Пресноводные Монадный 1 Достаточно часто из отдела Chlorophyta (зелёные водоросли) выделяют отдел Charophyta. Это очень близкие и, несомненно, родственные группы организмов. Их характеристика в общих чертах совпадает. Однако имеется целый ряд серьёзных отличий. У Charophyta жгутики только субапикальные, их базальные тела параллельны друг другу и лежат на многослойной белковой пластинке, от основания которой отходит лента из микротрубочек. В некоторых случаях жгутики могут быть покрыты органическими чешуйками. У Chlorophyta жгутики могут быть апикальными, субапикальными и латеральными. Базальные тела жгутиков (у всех, кроме пор, одна Trentepohliales) находятся под углом 90, белковая пластинка при основании отсутствует, от базальных телец отходят всего несколько микротрубочек. Запасной продукт у Charophyta также крахмал, но откладывается он в цитоплазме, а не в хлоропласте, как у Chlorophyta. В состав клеточной стенки помимо целлюлозы иногда входят гемицеллюлоза и лигнин. Целлюлозосинтазный комплекс у Charophyta розеткоподобный, а у Chlorophyta линейный. Митоз у представителей Chlorophyta закрытый или полузакрытый, а у Charophyta открытый. При цитокинезе у Chlorophyta образуется фикопласт (структура из микротрубочек, которая параллельна оси деления клетки, но перпендикулярна веретену деления клетки), в то время как у Charophyta образуется фрагмопласт (структура из микротрубочек, которая перпендикулярна оси деления клетки, но параллельна веретену деления клетки). У представителей пор одна Charophyta встречаются конъюгация и оогамия, в то время как у Chorophyta конъюгация не отмечена. Приложение 1. Краткая характеристика основных отделов грибов. 27

28 Хлорофиллы Дополнительные специфические пигменты Число мембран в хлоропласте Устройство фотосинтетического аппарата В разных сочетаниях a, a и b, a и c, а также a и d Фикобилины (линейные тетрапирролы), разнообразные каратиноиды и ксантофиллы Хлоропласты отсутствуют Есть отдельные мембранные пузырьки, на поверхности которых находятся фотосинтезирующие пигменты a Фикобилины 2 (первичный эндосимбиоз) Тилакоиды отдельные, не собраны в ламеллы и граны a и b Зеаксантин, виолаксантин, неоксантин и др. 2 (первичный эндосимбиоз) Тилакоиды собраны в граны a (всегда) и с 1, c 2, c 3 (в разных комбинациях) a и c 2 Фукоксантин или Пиридинин, вошериоксантин диноксантин, у Xanthophyceae диадиноксантин (Tribonema, Vaucheria) 4 (вторичный эндосимбиоз) Ламеллы трёхтилакоидные, имеется опоясывающая ламелла 3 (вторичный и третичный эндосимбиоз) Ламеллы трёхтилакоидные, опоясывающая ламелла отсутствует Та б л и ц а 3 (продолжение) a и b Зеаксантин, виолаксантин, неоксантин и др. 3 (вторичный эндосимбиоз) Ламеллы трёхтилакоидные, опоясывающая ламелла отсутствует 28 Биосистематика Запасной продукт Цианофицировый крахмал, азот запасается в цианофициновых гранулах, а фосфор в виде полифосфатов Багрянковый крахмал (при реакции с йодом даёт малиновую окраску) Крахмал (при реакции с йодом даёт синюю окраску) Хризоламинарин (полисахарид) и липиды У морских липиды, у пресноводных крахмал Парамилон (полисахарид)

29 Та б л и ц а 3 (продолжение) Состав клеточной стенки Сходна по составу с грамотрицательными бактериями, содержит муреин Состоит из структурного (целлюлоза), аморфного компонентов (агары и каррагинаны); иногда в состав клеточной стенки входит CaCO 3 Жгутики Отсутствуют Отсутствуют Клеточная стенка разнообразного строения, но в большинстве случаев содержит целлюлозу Два равных по длине и морфологии жгутика. Оба гладкие Различный. У диатомовых домик из кремнезёма. У многих целлюлоза, у бурых дополнительно альгинаты Один жгутик короткий, гладкий, другой длинный, покрыт двумя рядами трёхчастных мастигонем (рис. 6) Амфиесма (см. рис. 4) Два жгутика разной длины. Длинный, лежащий в поперечной борозде, со спирально закрученной аксонемой и параксиальным тяжем, короткий, в продольной борозде, обычного строения. Оба жгутика несут на себе волоски (рис. 7) Пелликула (см. рис. 5) Обычно 2 жгутика, начинаются от основания глотки. Жгутик дополнительно утолщён за счёт параксиального тяжа (рис. 8) Приложение 1. Краткая характеристика основных отделов грибов. 29

30 30 Биосистематика Приложение 2. Рекомендации по выполнению заданий олимпиады В данном приложении приведены примеры из задания кабинета биосистематики ЗЭ ВОШ за 2015 год. Задания в практическом туре Всероссийской олимпиады по биологии в разделе «Биосистематика» требуют от учащегося навыков работы с живыми и фиксированными объектами, а также умения «узнавать» объект и, применив знания о современных взглядах на систему органического мира, определить некоторые особенности его морфологии и физиологии. Во-первых, надо приготовить препарат (см. задание 1). Приготовление препаратов было подробно разобрано нами в разделе «Приготовление микропрепаратов». Важно помнить, что необходимо не только правильно и аккуратно приготовить препарат, но и найти на предметном стекле именно искомый объект. Далее обычно требуется отнести объект к империи или царству (задания 2 и 3) и дать краткую характеристику объектов (задание 4). Здесь учащийся должен внимательно ознакомиться с введением к заданию, в котором описано, из какого биотопа/биотопов взяты предложенные объекты. Это задаст верное направление для их классификации. Например, если сбор материала проводился в берёзовом лесу и близлежащем озере, то среди предложенных проб будут отсутствовать экстремофильные (т. е. все археи) и морские организмы (подавляющее большинство красных водорослей и многие другие). Зато с большой вероятностью будут представители настоящих грибов, наземных животных и пресноводных водорослей. Таким образом, постепенно перебирая в памяти основных представителей, которые могут быть обнаружены в подобных биотопах, вы сможете значительно сузить перечень рассматриваемых групп. Большинство предлагаемых объектов и их краткая характеристика приведены нами в пункте «Современные взгляды на систему органического мира», а также в приложениях. Также встречаются задания (задание 5), предполагающие умение работать с дихотомическим определительным ключом. При этом вам предлагают два утверждения, обычно противоречащие друг другу. Вы должны согласиться с одним из них и отвергнуть другое. Например, в тезе написано: «Организмы подвижны в вегетативном состоянии», а в антитезе «Организмы неподвижны в вегетативном состоянии». Рассмотрим пример задания 2015 года: предположим, что в вашем распоряжении находится образец с Euglena viridis (эвглена зелёная). Вы соглашаетесь с тезой о способности этого организма осуществлять фотосинтез (утверждение 01) и, таким образом, переходите к следую-

31 Приложение 2. Рекомендации по выполнению заданий олимпиады 31 щей паре утверждений (03 и 04). Форма тела эвглены не похожа на ветвящиеся нити (утверждение 03), следовательно, вы соглашаетесь с утверждением 04 и переходите к паре утверждений 05 и 06. Эвглена свободно живущий жгутиконосец, поэтому способна к активному движению. Подобная схема рассуждений может быть применена и для других организмов. При заполнении клеток дихотомической схемы следует помнить, что в одну клетку не может быть отнесено сразу два объекта. Если это произошло, пройдите по определительному ключу ещё раз. Рекомендуем сначала определять объекты, в характеристиках которых вы уверены, а затем, когда часть клеток на схеме для ответов уже будет занята, те организмы, в которых уверены меньше. Таким образом вы сможете снизить вероятность ошибки. Вопросы и демонстрационный материал в разделе «Биосистематика» меняются каждый год, но стоит помнить, что существует более или менее ограниченный набор объектов, которые легко доступны организаторам при подготовке заданий. Таким образом, для успешного выполнения всех заданий раздела необходимо уметь готовить микропрепараты и знать краткую характеристику весьма небольшого числа организмов. Список литературы 1. Белякова Г. А., Дьяков Ю. Т., Тарасов К. Л. Ботаника: в 4 томах. Т. 1. Водоросли и грибы. М.: Издательский центр «Академия», Белякова Г. А., Дьяков Ю. Т., Тарасов К. Л. Ботаника: в 4 томах. Т. 2. Водоросли и грибы. М.: Издательский центр «Академия», Зоология беспозвоночных в двух томах. Т. 1: от простейших до моллюсков и артропод / Под ред. В. Вестхайде и Р. Ригера. Пер. с нем. под ред. проф. А. В. Чесунова. М.: Т-во научных изданий КМК, Леонтьев Д. В. Общая биология: система органического мира. Конспект лекций. Изд. 2-е. Харьков: ХГЗВА, 2014; info/shipunov/school/books/leontjev2014_sist_organ_mira.pdf 5. Adl S. M., Simpson A. G. B., Lane C. E. et al. The Revised Classification of Eukaryotes // Eukaryot J. Microbiol V. 59, 5. P Burki F., Shalchian-Tabrizi K., Pawlowski J. Phylogenomics reveals a new megagroup including most photosynthetic eukaryotes // Biol Lett V. 4, 4. P Sakaguchi M., Takishita K., Matsumoto T., Hashimoto T., Inagaki Y. Tracing back EFL gene evolution in the cryptomonads haptophytes assemblage: Separate origins of EFL genes in haptophytes, photosyn-

32 32 Биосистематика thetic cryptomonads, and goniomonads // Gene V. 441, 1 2. P Cavalier-Smith T., Chao E. E., Stechmann A., Oates B., Nikolaev S. Planomonadida ord. nov. (Apusozoa): Ultrastructural Affinity with Micronuclearia podoventralis and Deep Divergences within Planomonas gen. nov. // Protist V. 159, 4. P

33 Об авторах Биосистематика Гмошинский Владимир Иванович, кандидат биологических наук, старший преподаватель кафедры микологии и альгологии биологического факультета МГУ. Область научных интересов: изучение видового разнообразия миксомицетов, а также особенностей биологии и экологии этой группы организмов. Биохимия Зотова Евгения Дмитриевна, серебряный призёр Международной биологической олимпиады (Корея, 2010), выпускница факультета биоинженерии и биоинформатики МГУ им. М. В. Ломоносова, аспирант и младший научный сотрудник Института биологии гена РАН. Занимается подготовкой школьников к биологическим олимпиадам всероссийского и международного уровня по направлениям биохимия, генетика и молекулярная биология. Лавренова Виктория Николаевна, двукратный серебряный призёр Международной биологической олимпиады (Сингапур, 2012; Швейцария, 2013); трёхкратный победитель Всероссийской олимпиады школьников по биологии ( гг.); трёхкратный призёр Всероссийской олимпиады школьников по химии ( гг.); студентка 4-го курса кафедры биохимии биологического факультета МГУ им. М. В. Ломоносова, научная работа посвящена изучению роли Na +, K + -АТФазы в функционировании клеток и проведении сигналов. Микробиология Звонарёва Елена Сергеевна, выпускница и ныне аспирант биологического факультета МГУ им. М. В. Ломоносова, кафедра микробиологии; также выпускница факультета педагогического образования МГУ. Научные интересы микробиология и биотехнология, физиология человека и животных. 2008, 2009 годы победитель Всероссийской олимпиады школьников по экологии. С 2014 года участвует в подготовке московских школьников к региональному и заключительному этапам Всероссийской олимпиады школьников по биологии (по направлению микробиология). Клеточная биология Шеваль Евгений Валерьевич, доктор биологических наук, старший научный сотрудник НИИ физико-химической биологии им. А. Н. Белозёрского МГУ. Голышев Сергей Александрович, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник НИИ физико-химической биологии им. А. Н. Белозёрского МГУ. Гистология Ганчарова Ольга Сергеевна, научный сотрудник отдела патоморфологии ВЭК ООО «НИИ Митоинженерии МГУ»; младший научный сотрудник лаборатории биомедицины отдела сигнальных систем клетки НИИ ФХБ им. А. Н. Белозёрского; преподаватель практикума по гистологии факультета биоинженерии и биоинформатики МГУ им. М. В. Ломоносова.